Kaþeksi; geleneksel beslenme desteði ile tamamen geri döndürülemeyen, ilerleyici fonksiyonel bozukluklara yol açan, iskelet kasý ve yað kütlesi kaybý ile karakterize olan çok faktörlü bir sendromdur. Kaþeksinin potansiyel biyobelirteçlerinden olan ve AZGP1(Alpha-2-Glycoprotein 1, Zinc-Binding) geni tarafýndan kodlanan çinko-α2-glikoprotein (ZAG), lipit mobilize edici bir faktör olarak tanýmlanmýþtýr. Adipoz doku preadipositlerin PPARγ ve C/EBPα gibi transkripsiyon faktörlerinin etkisi ile olgun adiposit hücrelerine dönüþmesi ile oluþmaktadýr. AZGP1’ in, bu transkripsiyon faktörlerini baskýlayarak adiposit farklýlaþmasýný ve lipit birikimini engellediði daha önceki yapýlan çalýþmalarda gösterilmiþtir. Ayrýca, AZGP1’in UCP-1(Uncoupling protein 1)’in ekspresyon seviyelerini arttýrarak beyaz adiposit hücrelerinin kahverengi adipositlere farklýlaþmasýný tetiklediði bildirilmiþtir. Literatürde yer alan bu veriler deðerlendirildiðinde AZGP1’ in enerji harcamasýný ve yað dokusu kaybýný hýzlandýrarak kaþekside yað katabolizmasýný artýrdýðý sonucuna ulaþýlmaktadýr. Paklitaksel birçok kanser türünün tedavisinde sýklýkla kullanýlan bir kemoterapötik ajandýr ve paklitaksel ile ilgili yapýlan çalýþmalara bakýldýðýnda adiposit farklýlaþmasýný ve AZGP1 ekspresyonu nasýl etkilediðini inceleyen bir çalýþmaya rastlanmamýþtýr. Bu çalýþmada, adipogenez sürecinde zaman baðýmlý olarak uygulanan paklitakselin lipid birikimi ve kaþeksi iliþkili AZGP1 geni ifadelenmesi üzerindeki etkisinin araþtýrýlmasý amaçlanmýþtýr. Çalýþmada, insan preadiposit hücreleri 37°C ve %5 CO2 þartlarýnda ticari olarak satýn alýnan preadiposit büyüme besiyerinde çoðaltýlmýþtýr. Çoðalan hücreler 12 kuyucuklu hücre kültür tabaklarýna her kuyucukta 1000 hücre olacak þekilde ekilmiþ ve farklýlaþmanýn tamamlanma süreci olan 15 gün boyunca 3 gün ara ile 50nM paklitaksel+farklýlaþma mediumu uygulanmýþtýr. Uygulama zaman baðýmlý olarak 0. Gün, 3. Gün, 6. Gün ve 12. Gün paklitaksel+farklýlaþma besiyeri þeklinde yapýlmýþtýr. 15. Günün sonunda lipid birikiminin tespiti için hücreler Oil Red O boyama yapýlmýþ ve gen analizi için total RNA izolasyonu yapýlmýþtýr. Çalýþmamýzýn sonuçlarýna göre farklý zamanlarda verilen paklitakselin, insan preadipositlerinde farklýlaþmayý ve lipit birikimini baskýladýðý (p<0.01) tespit edilmiþtir. RT-PCR (gerçek zamanlý polimeraz zincir reaksiyonu) ile yapýlan gen ifade analizi sonucunda zaman baðýmlý uygulanan paklitakselin, PPARγ gen ifadesini azalttýðýný (p<0.05) ancak AZGP1’ýn gen ifade seviyesinde bir deðiþikliðe neden olmadýðý (p>0.05) tespit edilmiþtir. Sonuç olarak paklitakselin adipogenez sürecini baskýladýðý ve bu süreçte PPARγ gen ifadesini baskýladýðýný ancak kaþeksi biyobelirteci olan AZGP1’ in gen ifadesinde anlamlý bir deðiþim göstermediði sonucuna ulaþýlmýþtýr. Gen düzeyinde yapýlan bu çalýþmanýn bir sonraki aþamasý olarak ZAG protein seviyesindeki deðiþimin ve muhtemel kaþeksi yolaklarýnýn saptanarak paklitaksel etkisinin analiz edilmesi planlanmaktadýr.
Anahtar Kelimeler: Adipogenez, AZGP1, kaþeksi, paklitaksel
|
