Amaç: İn vitro Parkinson modelinde kateşin ve epigallokateşin gallatın hücre canlılığı üzerindeki etkilerini araştırmaktır.
Yöntem: Çalışmada SK-N-AS insan nöroblastoma hücreleri DMEM, %10 fetal sığır serum, %1 penisilin-streptomisin, %1 L-glutamin içeren kültür vasatı içerisinde 37°C’de %5’lik karbondioksitli ortamda kültüre edildi. İn vitro Parkinson modeli için SK-N-AS hücreleri 24 ve 48 saat süresince 25 μM, 50 μM veya 100 μM konsantrasyonlardaki 6-hidroksi dopamine maruz bırakıldı. Model kontrolü kültür vasatlarındaki dopamin ve α-sinüklein düzeylerinin ELISA analizi sonrasında yapıldı. Kateşin ve epigallokateşin gallat beş farklı konsantrasyonda (10 μM, 50 μM, 100 μM, 150 μM, 200 μM) SK-N-AS (kontrol) ve in vitro Parkinson model hücrelere 24 ve 48 saat uygulandı. Hücre canlılıkları, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) testi ile rutin protokol ile ölçüldü.
Bulgular: 6-hidroksi dopamin uygulaması sonrasında, α-sinüklein düzeylerinin Parkinson model hücrelerde kontrol grubuna göre 24 saatlik uygulama sonrasında 50 μM konsantrasyonda daha yüksek olduğu saptandı. Dopamin düzeylerinin ise 24 saatlik uygulama sonrasında 50 μM uygulanan parkinson model hücrelerde kontrol grubuna göre daha düşük olduğu bulundu. Kateşin ve epigallokateşin gallatın 24 saat 100 μM konsantrasyondaki uygulamalarının in vitro Parkinson modelinde kontrol grubuna göre hücre canlılığını artırdığı saptandı.
Sonuç: Çalışmada 6-hidroksi dopamin maruziyeti sonrasında dopamin düzeyinin azalması, α-sinüklein düzeyinin artması ile 24 saatlik 50 μM 6-hidroksi dopamin uygulamasının in vitro Parkinson modeli oluşumunu sağladığı sonucuna varıldı. Bununla birlikte kateşin ve epigallokateşin gallat’ın hücre canlılığını parkinson model hücrelerde kontrol hücrelere nazaran daha fazla artırması üzerine, her iki biyoaktif bileşenin uygulama sonrasında parkinson model nöron hücrelerde potansiyel koruyucu etkilerinin olabileceği düşünüldü.
Anahtar Kelimeler: Kateşin, Epigallokateşin gallat, İn vitro Parkinson modeli, 6-hidroksi dopamin
|
